氨基液相色譜柱用于快速分離混合極性樣品,與C8或C18柱相比,疏水性較小,通常可使用水相成分高的洗脫液。對非極性化合物表現(xiàn)了更短的保留時間,對極性化合物幾乎沒有明顯影響。它是以液體作為流動相的一種色譜分析法,它亦是根據(jù)不同組分在流動相和固定相之間的分配系數(shù)的差異來對混合物進行分離的。氣相色譜中評價色譜柱柱效的方法及計算理論塔板數(shù)的公式同樣適合于高效液相色譜。
液相色譜系統(tǒng)主要由貯液瓶、泵、進樣器、柱子、柱溫箱、檢測器、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)組成。對于整個系統(tǒng)而言,柱子、泵和檢測器是核心部件同時也是易出問題的主要部位。
氨基液相色譜柱的使用說明:
1、使用前注意事項:
儲存液無特殊說明,均為評價報告所示的流動相。在使用前,一定要注意儲存液與要分析樣品的流動相是否互溶。在反相色譜中,如用高濃度的鹽或緩沖液作洗脫劑,應(yīng)先用10%左右的低濃度的有機相洗脫劑過渡一下,否則緩沖液中的鹽在高濃度的有機相中很容易析出,堵塞色譜柱。
2、流動相:
流動相中所使用的各種有機溶劑要盡可能使用色譜純,配流動相的水較好是超純水或全玻璃器皿的雙蒸水。如果將所配得流動相再經(jīng)過0.45μm的濾膜過濾一次則更好,尤其是含鹽的流動相。另外,裝流動相的容器和色譜系統(tǒng)中的在線過濾器等裝置應(yīng)該定期清洗或更換。
以常規(guī)硅膠為基質(zhì)的鍵合相填料通常的pH值適用范圍。當必須要在pH值適用范圍的邊界條件下使用色譜柱時,每次使用結(jié)束后立即用適合于色譜柱儲存并與所使用的流動相互溶的溶劑清洗,并*置換掉原來所使用的流動相。
3、樣品:
樣品也要盡可能清潔,可選用樣品過濾器或樣品預(yù)處理柱對樣品進行預(yù)處理;若樣品不便處理,要使用保護柱。在用正相色譜法分析樣品時,所有的溶劑和樣品應(yīng)嚴格脫水。