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1. 鹽酸克林霉素含量測定  參考《中國藥典》（2020版）

鹽酸克林霉素 M.W. 461.444

按照20版藥典鹽酸克林霉素含量測定項(xiàng)下方法，使用CAPCELL PAK C18 MGII色譜柱，對(duì)供試品進(jìn)行了分析，結(jié)果如圖1圖2所示。

供試品分析結(jié)果中，主峰保留時(shí)間11.013min，與相對(duì)保留時(shí)間0.8的7-差向克林霉素峰（8.988min）分離度為6.17，相對(duì)保留時(shí)間0.65的克林霉素B峰（7.247min）與7-差向克林霉素峰分離度為6.817，均能夠滿足藥典分離度不低于3的要求。

圖1 鹽酸克林霉素分析結(jié)果

圖2 局部放大圖

【色譜條件】

色譜柱：CAPCELL PAK C18 MGII S5; 4.6×250

流動(dòng)相：以磷酸二氫鉀溶液（每1 mL中含磷酸二氫鉀6.8 mg，用25%的氫氧化鉀溶液調(diào)節(jié)pH值至7.5）/ 乙腈 = 55 / 45

流動(dòng)速：1.0 mL/min

溫動(dòng)度：35 °C

檢動(dòng)測：PDA 210 nm

濃動(dòng)度：供試品溶液 1 mg/mL（甲醇）

進(jìn)樣量：20 µL

結(jié)     論

使用CAPCELL PAK C18 MGII色譜柱可在藥典條件下，實(shí)現(xiàn)鹽酸克林霉素含量測定分析，分離度及保留時(shí)間符合藥典要求。

2. 碘海醇水解物的分析

客戶提供了碘海醇水解物（固體），并反映使用Y公司的ODS-AQ柱做該項(xiàng)目色譜柱壽命短，希望本實(shí)驗(yàn)室能夠篩選出對(duì)碘海醇水解物具有良好分離，同時(shí)還能有良好的使用壽命的色譜柱。

使用CAPCELL PAK C18 MGII色譜柱進(jìn)行了分析，按照客戶提供方法，對(duì)碘海醇水解物的分析結(jié)果見圖3和表1。主峰前分離出兩個(gè)比較明顯的雜質(zhì)峰，且兩個(gè)雜質(zhì)以及雜質(zhì)與主峰之間的分離度均大于1.5。

圖3  C18 MGII色譜柱分析結(jié)果

表1   各峰積分結(jié)果表

【色譜條件】

色譜柱：CAPCELL PAK C18 MGII S3; 4.6×250

流動(dòng)相：A，0.05%三弗乙 酸水   B，三弗 乙 酸 / 乙腈 / 甲醇 = 0.05 / 50 / 50

         B% 1%(0 min)-10%(42 min)-75%(53 min)-75%(58 min)-1%(58.01 min)-1%(70 min)

流動(dòng)速：0.6 mL/min

溫動(dòng)度：45 ℃

檢動(dòng)測：UV 254 nm

進(jìn)樣量：15 µL

濃動(dòng)度：1 mg/mL（溶劑為甲醇：水=1：99）

結(jié)     論

使用CAPCELL PAK C18 MGII色譜柱，按照客戶提供分析方法，對(duì)碘海醇水解物供試品進(jìn)行分析，分離度較好。

流動(dòng)相條件中，梯度起始有機(jī)相比例僅為1%，因此在不同設(shè)備上可能會(huì)出現(xiàn)保留時(shí)間和分離度上略有差異的情況。建議適當(dāng)調(diào)整梯度中有機(jī)相的起始比例，并在色譜柱使用完后及時(shí)進(jìn)行沖洗，以減少高水相流動(dòng)相可能對(duì)色譜柱帶來的損傷。